HIV markerové ochorenia.

Diéty

Oportúnne choroby pri infekcii HIV

Boj s infekciou HIV vo väčšine prípadov skôr alebo neskôr vedie k oslabeniu imunitnej obrany. Nastal čas, kedy zníženie imunity umožní rozvoj chorôb spôsobených oportunistickými patogénmi.

Sekundárne ochorenia, ktoré sa u ľudí s imunodeficienciou vyvíjajú, sa z latinského slova "opportunitas" nazývajú "oportunistické" - priaznivý moment, príležitosť. To znamená, že takéto ochorenia sa rozvíjajú iba pri určitom sútoku priaznivých podmienok pre nich. Najčastejšie príležitostné ochorenia sú spôsobené oportunistickými patogénmi, ktoré nevedú k ochoreniu v normálnom stave imunity. Ale existujú výnimky. Napríklad pôvodca tuberkulózy, ktorý sa často vyvíja u jedincov infikovaných vírusom HIV, nepatrí k oportunistickým mikroorganizmom. A vzťah Kaposiho sarkómu s akýmkoľvek infekčným agensom vo všeobecnosti ešte nebol preukázaný.

V literatúre sa vyskytuje pojem "ochorenia spojené s AIDS", "AIDS-indikátorové ochorenia" a "choroby markerov AIDS". Nie sú to úplne správne definície. Len určité ochorenia sú spoľahlivým znakom zníženia imunity pri infekcii HIV. Detekcia týchto ochorení má nezávislú diagnostickú hodnotu.

Oportúnne infekcie sú protozoálne (spôsobené prvokmi), hubami, baktériami a vírusmi. Najvýznamnejšími predstaviteľmi protozoa sú pneumocysty, toxoplazmy, črevné kokcidie, izospóry. V posledných rokoch sú pacienti často identifikovaní leishmania, trypanozómy, cyklospóry. Zvláštne miesto je obsadené pneumocysty, pretože pneumocystická pneumónia zostáva najcharakteristickejším a najzávažnejším prejavom infekcie HIV.

Medzi hubami, ktoré spôsobujú ochorenia, oportúnne predovšetkým izolované huby rodu Candida, čo môže viesť k strate žiadneho subjektu, od kože a končiac vážne poškodenia pažeráka a čriev. Významné oportúnne huby zahŕňajú kryptokoky a aspergilus, ktoré spôsobujú ťažké systémové lézie.

Choroby spôsobené protozoami (toxoplazmóza a leishmanióza) vedú k vážnemu poškodeniu imunitného systému. V podmienkach infekcie HIV zhoršujú imunodeficienciu, čo prispieva k ich rýchlemu rozšíreniu do tela pacienta.

Z bakteriálnych infekcií je tuberkulóza, ktorá sa na svete šíri alarmujúcou rýchlosťou, v súčasnosti najväčšou dôležitosťou. S rastom epidémie HIV sa zvyšuje frekvencia atypickej mykobakteriózy, ktorá sa prejavuje ťažkými generalizovanými léziami, čo vedie k smrti pacientov.

Medzi vírusovými infekciami vedie infekcia cytomegalovírusom. Cytomegalovírusové poškodenie centrálneho nervového systému, gastrointestinálneho traktu, pľúc a očí zaberajú jedno z prvých miest medzi príčinami smrti pacientov.

Medzi malígnymi nádormi postihujúcimi pacientov s infekciou HIV je prvé miesto obsadené Kaposiho sarkómom.

Obdobie choroby, keď sa prejavujú oportúnne choroby, sa nazýva IV stupeň HIV infekcie alebo obdobie sekundárnych ochorení.

Možnosť prejavenia rôznych oportúnnych infekcií závisí od hladiny buniek CD4:

- Kandidóza ústnej sliznice;

- chlupatá leukoplakia ústnej sliznice;

Zníženie hladiny CD4 lymfocytov vedie k vzniku závažnejších komplikácií - bakteriálnych a plesňových lézií, vrátane:

- miliárdová a extrapulmonárna tuberkulóza;

- kandidóza zápal pažeráka.

Táto miera poklesu imunity zodpovedá zvýšeniu vyčerpania, rozvoju demencie (demencie), kardiomyopatii, progresívnej polyneuritide.

Diagnóza AIDS (terminálny stupeň infekcie HIV) u dospelých sa robí pri detekcii protilátok v krvi pacienta s protilátkami proti HIV a pri identifikácii nasledujúcich ochorení (WHO kritériá, 1993):

Kandidóza priedušnice, priedušiek a pľúc

Rakovina krčka maternice

Kokcidiomykóza (bežné a extrapulmonárne)

Chronická kryptosporidóza čreva

Cytomegalovírusová infekcia s rôznymi orgánovými poškodeniami

Cytomegalovírusová retinitída (zápal sietnice) so stratou videnia

Encefalopatia spôsobená HIV

Infekcie spôsobené vírusom herpes simplex: bronchitída, pneumónia

Histoplazmóza (rozšírená alebo extrapulmonálna)

Primárny lymfóm mozgu

Mykobakterióza je rozšírená a extrapulmonárna

Tuberkulóza pľúc a extrapulmonárna

Opakovaná pneumónia (dve alebo viac počas roka)

Progresívna multifokálna leukoencefalopatia

Septické podmienky spôsobené salmonelou

Syndróm vyčerpania spôsobený účinkom HIV

Oportúnne choroby sú hlavnou príčinou lézií a úmrtí u pacientov s AIDS. Ich vývoj a priebeh určujú klinický obraz a závažnosť ochorenia. Z včasnej diagnostiky oportúnnych ochorení závisí úspešnosť liečby a očakávaná dĺžka života pacientov, ako aj preventívne opatrenia na zabránenie ich rozšírenia u pacientov a zdravotníckych pracovníkov.

Značky infekcie HIV

• povinná - stanovenie protilátok proti HIV.
- Detekcia protilátok Enzyme-linked ImmunoSorbent assay na gpl20, gp41, gpl20 / 160, atď. Na pevnej fáze ELISA -. Najbežnejšie metóda laboratórneho detekcie anti-HIV protilátok, ktorých citlivosť a špecifickosť 99% je dosiahnuté. Falošne pozitívne výsledky môžu byť spôsobené prítomnosťou autoimunitnej patológie pacienta, tehotenstvom a mnohými ďalšími dôvodmi.
- Stanovenie protilátok proti dvom alebo viacerým antigénom HIV imunoblotovou metódou. Imunoblotting je kvalitatívna metóda, ktorá umožňuje detekciu protilátok súčasne s množstvom HIV antigénov.

• Ďalšia definícia HIV antigénov. - Stanovenie HIV v lymfocytoch pomocou PCR.
Stanovenie antigénu p24 testom ELISA. - HIV izolácia v kultúre in vitro. Nešpecifické laboratórne markery

• Zníženie počtu CD4 T buniek.
• Znížený index imunoregulácie (pomer T buniek CD4 + / CD8) je menší ako 1.

Antigénne markery HIV sú zistené v krvi oveľa skôr. Takže od 2. do 8. týždňa po infekcii sa deteguje proteín p24. Ak sa v testovacích systémoch tohto typu získajú pozitívne výsledky, mal by sa urobiť test na protilátky proti HIV. Súčasná detekcia anti-HIV protilátok a antigénov signifikantne znižuje periódu séro-negatívneho okienka.

V Z Ruska Bola akceptovaná trojstupňová detekcia protilátok proti HIV. Negatívny štádiu skríningu Diagnostika ELISA sa považuje za konečnú. Pozitívny výsledok testu ELISA vyžaduje dvojitú kontrolu pomocou testovacích systémov inej série. Dvojitý negatívny výsledok sa považuje za konečný. Ak sa opakuje pozitívny výsledok testu ELISA, je potrebná imunoblotová analýza na celulózovej membráne. Detekcia protilátok proti dvoch alebo troch vírusových antigénov (jadrového antigénu gp41, gpl20 a ich prekurzora gpl60), slúži ako základ pre laboratórne potvrdenie diagnózy infekcie HIV. Stanovenie imunoblotov protilátok proti akémukoľvek proteínu vírusu sa považuje za pochybný výsledok, čo si vyžaduje dynamickú kontrolu po 3 a 6 mesiacoch.

K metódam špecifickej diagnózy infekcie HIV nesú aj PCR. Identifikácia v 1 ml krvi, je menšia ako 500 kópií vírusovej RNA naznačuje významné obmedzenie infekčného procesu, od 500 do 99 000 - miernej intenzity, a identifikácia 100.000 kópií alebo viac v 1 ml - aktívny proces replikácie patogénu.

PCR má veľký význam, keď testy protilátok proti HIV a antigénom poskytujú negatívny výsledok, inými slovami, v latentnom období ochorenia. PCR môže byť napríklad použitá na stanovenie diagnózy u detí narodených HIV infikovaným matkám. Materské protilátky cirkulujú v krvi dieťaťa do 15-18 mesiacov a PCR môže detekovať HIV už v prvom mesiaci života. Okrem toho môže byť PCR použitá na kvantifikáciu aktivity infekčného procesu počtom vírusových kópií RNA (úroveň vírusového zaťaženia). V rôznych obdobiach infekčného procesu sa úrovne anti-HIV protilátok a vírusového zaťaženia značne líšia. Laboratórne metódy na stanovenie špecifických markerov HIV sa používajú nielen na diagnostiku, ale aj na hodnotenie aktivity procesu, predpovedanie priebehu ochorenia, stanovenie rozsahu a účinnosti antivírusovej liečby.

spoľahlivý laboratórne dôkazy o infekcii HIV - identifikácia a identifikácia kultúry HIV. Táto metóda však vyžaduje dlhú dobu, špeciálne vybavenie, vysokú kvalifikáciu výkonných umelcov a vykonáva sa v špecializovaných laboratóriách v ťažkých prípadoch diagnostiky.

Preskúmať stupeň imunitnej nedostatočnosti u pacientov s infekciou HIV je dôležité sledovať indikátory imunitného stavu. Určenie počtu CD4 + T-lymfocytov má prvoradý význam, pretože sú hlavnými cieľovými bunkami vírusu a ich poškodenie určuje hĺbku imunosupresie.

Infekcia HIV

34.2 Klinika, laboratórna diagnostika, liečba.

etiológie: vírus ľudskej imunitnej nedostatočnosti zo skupiny retrovírusov.

epidemiológia. Spôsoby prenosu infekcie HIV: 1.seksualny (75%) 2.parenteralny (IUD krvný transfúziou, pri invazívnej postupy.) 3. z matky na plod (v maternici Transplacentárne alebo počas kŕmenia)

patogenézy: Základ - vírusové infekcie buniek nesúcich CD4 + receptor (predovšetkým T-pomocné bunky) a ich následnej likvidácii, a buniek, ktoré nesú na svojom povrchu chemokinových receptorov. Súčasne vzniká stav imunitnej nedostatočnosti s progresívnym poklesom T-pomocných buniek.

Infekcia HIV je choroba, ktorá zahŕňa Spektrum syndrómov a rôzne asociované a indikatívne ochorenia. Postupná dysfunkcia imunity v priebehu času vedie k rozvoju oportunistických infekcií a neoplázie, ktorá určuje vývoj AIDS a ktorá nakoniec vedie k smrti. Obdobie od okamihu infekcie po smrť u rôznych pacientov je odlišné, ale pri absencii účinnej antiretrovírusovej terapie je to v priemere 10-12 rokov.

Klinický obraz HIV, štádiá ochorenia:

1. inkubačná doba - do jedného mesiaca, hoci môže trvať až 10 rokov. Po tomto období sa objavujú protilátky proti HIV alebo klinické symptómy ochorenia.

2. asymptomatický štádiu infekcie HIV

A) akútna infekcia (primárna infekcia alebo akútny retrovírusový syndróm) Je počiatočné potlačenie T buniek. Vyvíja sa u väčšiny pacientov infikovaných vírusom HIV a 90% má klinický obraz infekčnej mononukleózy alebo príznakov, ktoré sú podobné závažnej chrípke. Tieto príznaky sa najčastejšie vyskytujú 1-3 týždne po infekcii a trvajú 1-6 týždňov. Charakterizované horúčkou, bolesťou v krku, bolesť hlavy, bolesť svalov a kĺbov, nevoľnosť, vracanie, zápal hltana, dlhotrvajúceho hnačke, lymfadenopatiu, môžu byť hyperémia krku, letargia. Častým klinickým príznakom v tomto štádiu je vyrážka (erytematózna alebo makulopapulárna vyrážka na tvári a kmeň, niekedy na končatinách). Neurologické symptómy môžu byť reprezentované meningoencefalitídou, periférnou neuropatiou, paralýzou tváre, Guillain-Barreovým syndrómom, radikulopatiou. Imunologické poruchy môžu zahŕňať prechodnú miernu leukopéniu, lymfopéniu, trombocytopéniu a relatívnu lymfocytózu a atypické mononukleáry. Počas tohto obdobia sa môže zistiť prechodný pokles lymfocytov CD4 +. Spravidla sa hladina CD4 + buniek následne zvyšuje, ale zvyčajne sa nevráti na základnú úroveň. Úroveň viremie v tomto období je veľmi vysoká. Detekcia protilátok proti HIV v tomto štádiu nie je konštantná a často má negatívny výsledok.

b) asymptomatická infekcia (sérokonverzia) - Vychádza z akútnej fázy ochorenia, ale pri absencii príznakov ochorenia môže krv detekovať izoláty HIV v dôsledku pomalej replikácie. Určenie imunologických indikátorov, detekcia ich poklesu môže byť dôležitá pre predikciu progresie ochorenia, ale je spoľahlivejšie určiť úroveň virémie.

Protilátky proti HIV sa začínajú detegovať 1-3 týždne po akútnom štádiu alebo 6-8 týždňov po infekcii. Titr Jg M dosahuje vrchol po 2-5 týždňoch po zmiznutí príznakov a pretrváva až 3 mesiace. Jg G sa objavujú krátko po Ig M.

c) generalizovaná perzistujúca lymfadenopatia - najčastejšie zistené iba v lekárskom vyšetrení, je výsledkom aktivácie B-lymfocytov. Zvážte zvýšenie dvoch alebo viacerých skupín lymfatických uzlín po dobu troch alebo viacerých mesiacov. Okrem zvýšenia a niekedy i bolestivé lymfatické uzliny, často s nízkou horúčku, zväčšenie pečene a sleziny sa môže vyvinúť dermatologické prejavy (seboroická dermatitída, lupienka, folikulitídy). V tomto štádiu sa často vyskytuje infekcia s vysokou koncentráciou vírusu v mozgu, avšak zvyčajne chýbajú neurofyziologické symptómy. Charakteristické je, že perzistentné zníženie hladín lymfocytov CD4 + počas tohto obdobia je približne 40 až 80 buniek / mm3 počas každého roku infekcie. Trvanie tohto obdobia sa pohybuje od 3 do 10-15 rokov.

3. Komplex súvisiaci s AIDS (SAK) alebo včasný symptomatický štádiu HIV - sa vyvinie, keď hladina CD4 + buniek klesne pod 500, ale viac ako 200 buniek / mm3, je spojená s rizikom vzniku oportúnnych infekcií. Klinický prejav SAK je sprevádzaný objavením sa ústavných príznakov: horúčka, bohaté nočné potenie, strata hmotnosti 10% alebo viac, progresívna slabosť. Charakteristika dermatologických symptómov, poškodenie sliznice ústnej dutiny, recidivujúca herpetická infekcia, rekurentná kandidóza kože a slizníc. Často sú infekcie horných dýchacích ciest (sinusitída, bronchitída, pneumónia), zápalové ochorenia panvových orgánov, cervikálny dysplázie, periférna neuropatia. Trvanie infekčného procesu je od 3 do 7 rokov.

Klinické markery SAK: Strata hmotnosti o 10% alebo viac; nemotivovaná horúčka po dobu jedného mesiaca alebo dlhšie; nemotivovaná hnačka s dĺžkou viac ako 1 mesiac; bohaté nočné potenie; syndróm chronickej únavy; leukoplakia jazyka; recidivujúca orofaryngálna kandidóza; pľúcna tuberkulóza; cheilitída, onychomykóza; zápalové ochorenia panvových orgánov, najmä s vývojom tubovariálnych abscesov; trombocytopénia; listérie

4. stupňa AIDS, alebo Neskorý štádium symptómov sa vyvíja na úrovni CD4 + lymfocytov nižších ako 200 buniek / mm3 a trvania infekčného procesu v priebehu 7-10 rokov. V mnohých prípadoch sa choroba vyvíja rýchlejšie a po 2-3 rokoch prechádza do terminálneho štádia. Charakterizované ťažkými, život ohrozujúcimi infekciami a malígnymi novotvarmi, ktoré majú všeobecnú formu. Existujúce lézie orgánov a systémov u pacientov sú nezvratné. V súvislosti so zvyšujúcou sa imunosupresiou sa vyvinú ťažké progresívne ochorenia, ktoré sa nevyskytujú u osoby s normálne fungujúcim imunitným systémom (ochorenia ukazovatele AIDS).

Laboratórna diagnostika infekcie HIV

1. Sérologické metódy detekcia protilátok (AT) proti HIV - štandard pre diagnózu HIV infekcie (ELISA na báze syntetických peptidov - majú takmer 100% citlivosť a špecifickosť). ELISA umožňuje identifikovať AH HIV, čo môže byť ukazovateľom včasnej infekcie alebo naopak, neskorý - pokročilý vývoj infekcie HIV (p24 AH)

2. Potvrdzovacie testy - imunoblotovanie (IB), nepriama imunofluorescencia (NIF) a rádioimunoprecipitácia (RIP).

a) WHO odporúča, aby sérum, ktoré má protilátky proti dvom obalovým proteínom a jednému z interných proteínov HIV, bolo považované za pozitívne. Pacienti, ktorí sú pozitívne ELISA, ale s neistým výsledkami v IB, by mali byť hodnotené klinicky a vyhodnocované inými spôsobmi, lekárskeho vyšetrenia, imunologicky a po 3 - 6 mesiacov od ich séra, ktoré majú byť testované na protilátky HIV.

b) metóda nepriamej imunofluorescencie (NIF) - sa používa ako potvrdzujúci test v mnohých laboratóriách alebo ako skríningový test.

c) rádioimunoprecipitácia je vysoko citlivá a špecifická metóda založená na použití rádioaktívne značených aminokyselín. Metóda je vysoko citlivá na detekciu protilátok proti povrchovým proteínom a je preto vysoko špecifická, pretože tieto vírusové zložky sú prítomné prakticky u všetkých HIV-infikovaných pacientov po sérokonverzii.

3. Molekulárne biologické metódy: metóda molekulovej hybridizácie nukleových kyselín, PCR

1) ako alternatívna a dodatočná potvrdzujúca metóda na zistenie prítomnosti vírusu v tele vzhľadom na sérologické metódy laboratórnej diagnostiky;

2) ako prvú metódu špecifickej analýzy pri diagnostike včasnej HIV infekcie, keď ešte nie sú k dispozícii špecifické protivírusové protilátky;

3) diagnostikovať infekciu HIV novorodencov z HIV-infikovaných matiek;

4) určiť vírusovú záťaž a predpísať špecifickú antiretrovírusovú terapiu a monitorovať jej podávanie;

5) ako metóda rafinácie pre nejasné sérologické výsledky a pre nezhodu sérologických a kultúrnych analýz;

6) pri štúdiu sexuálnych partnerov HIV infikovaných osôb;

7) ako metódy diferenciálnej diagnózy HIV-1 a HIV-2;

4. Virologická metóda.

1. Zásady antiretrovírusovej liečby: liečba by mala začať pred vznikom významnej imunodeficiencie; Počiatočná liečba by mala zahŕňať kombinácie najmenej troch liekov; Modifikácia terapie by mala spočívať v nahradení alebo pripojení najmenej dvoch nových liekov; je mimoriadne dôležité merať hladinu CD4 + buniek a vírusovej záťaže; zníženie vírusovej záťaže na úroveň pod detekčným limitom citlivých techník odráža optimálny účinok liečby.

2. Existujú tri skupiny moderných antiretrovírusových liekov:

A) nukleozidové inhibítory reverznej transkriptázy (NRTI): Zidovudín (azidothymidín, retrovír); didanozín (ddl, videk); zalcitabín (ddC, hivid); stavudín (zerit, d4T); lamivudín (3TC, epivir); abacavir; adefovir; Kombivir (zidovudín + abakavir); trizivir (zidovudín + lamivudín + abakavir); adefovir (nukleotidové inhibítory reverznej transkriptázy).

B) nenukleozidové inhibítory reverznej transkriptázy (NNRTI): Delaverdin (rescriptor); nevirapín (Viramune); Efavirenz.

B) inhibítory proteáz (PI): sachinavir; ritonavir (norvir); indinavir (cryschen); nelfinavir (viracept); amprenavir (agenaraz); lopinavir (aluviran); kaletra (lopinavir + ritonavir).

3. Monoterapia s akýmkoľvek liekom nemôže poskytnúť dostatočne výrazné a dlhotrvajúce potlačenie replikácie HIV. Navyše pri monoterapii sa zvyšuje riziko vzniku rezistentných kmeňov a vývoj krížovej rezistencie na lieky rovnakej skupiny. Jedinou výnimkou je použitie zidovudínu ako monoterapie na zníženie rizika perinatálneho prenosu HIV.

4. Najdôležitejším kritériom účinnosti terapie je dynamika vírusovej záťaže, ktorá by mala byť stanovená: žiadna liečba - každých 6-12 mesiacov, s liečbou - každé 3-6 mesiace a 4-8 týždňov po začatí antivírusovej terapie.

Okrem antiretrovírusovej terapie je potrebná aj liečba sekundárnych ochorení.

34.3 AIDS (klinické varianty, oportunistické ochorenia).

Oportúnne choroby - závažné progresívne ochorenia, ktoré sa vyvíjajú na pozadí zvyšujúcej sa imunosupresie a nevyskytujú sa u osoby s normálne fungujúcim imunitným systémom (ochorenia indikujúce AIDS).

a) prvá skupina - sú choroby, ktoré sú neodmysliteľné len pri ťažkej imunodeficiencii (hladina CD4 +

Značky infekcie HIV

Klinická a laboratórna diagnostika infekcie HIV má tri smery:

  1. Zistenie faktu HIV infekcie, diagnostika HIV infekcie.
  2. Určenie štádia klinického priebehu ochorenia a identifikácia sekundárnych ochorení.
  3. Prognóza progresie klinického priebehu ochorenia, laboratórne monitorovanie účinnosti liečby a vedľajšie účinky antiretrovírusových liekov.

1. Identifikácia infekcie HIV, diagnostika HIV infekcie

Na stanovenie infekcie HIV sa používajú nasledujúce špecifické ukazovatele: HIV protilátky, HIV antigény, HIV RNA a provirus DNA. Protilátky proti HIV sa určujú metódou enzýmovej imunoanalýzy (ELISA) alebo imunoblotovania, čo je v skutočnosti druh ELISA. Antigény (proteíny) HIV sa určujú metódou ELISA. Pomocou molekulárnych genetických metód polymerázovej reťazovej reakcie (PNR) a bDNA možno určiť HIV RNA a DNA provírusov. Pridanie metódy hybridizácie nukleových kyselín so špecifickými DNA sondami umožňuje overiť špecificitu DNA sekvencií získaných počas PCR. Citlivosť PCR je detekcia vírusových génov v jednej z piatich tisíc buniek [27].

Pri primárnej infekcii sa pozoruje nasledujúca dynamika markerov HIV v krvi infikovaných ľudí. V prvom mesiaci v dôsledku aktivácie replikativní procesu dochádza k prudkému nárastu vírusovej záťaže (obsah plazmatickej HIV RNA), a potom, vzhľadom k masové šírenie vírusu a infekciu cieľových buniek v krvi a lymfatických uzlín, je možné určenie provirové DNA. Najdôležitejšou diagnostickou hodnotou je skutočnosť, že sa odhalí DNA provírusu integrovaného do genómu cieľovej bunky.

Vírusová záťaž odráža intenzitu replikačného procesu v infikovaných bunkách. Počas obdobia primárnej infekcie je úroveň vírusovej záťaže iná, keď je infikovaná rôznymi podtypmi HIV, ale dynamika jej zmien je približne rovnaká. Tak, keď infikované subtypu B, napríklad, v prípade, že prvý mesiac po výzva hodnotu vírusovej záťaže 700 kópií / ml, potom sa v 2. mesiaci je zníženie na 600, do 3 minút - až 100, 4 minúty - 50 kópie / ml. Takáto dynamika sa pozoruje na pozadí zvyšovania obsahu špecifických protilátok proti HIV v krvi. Obsah provirálnej DNA v krvných mononukleárnych bunkách pacientov infikovaných HIV je charakterizovaný relatívnou stálosťou počas prvých 6 mesiacov s nevýznamnými výkyvmi u niektorých subtypov. RNA a DNA teda nie sú totožné.

V inkubačnom štádiu sa po určitý čas nevytvorili žiadne špecifické protilátky proti HIV v množstve dostatočnom na stanovenie existujúcimi laboratórnymi metódami. Predtým, ako sa protilátky zaregistrujú veľmi krátko, objaví sa v krvi proteín Nef, ktorý je potlačený replikačným procesom, a štrukturálny proteín p24. Antigén p24 sa môže detegovať v krvi metódou imunoenzymatickej analýzy po 1-2 dňoch po infekcii a stanoviť až do 8. týždňa, potom sa jeho obsah prudko zníži. Ďalej v klinickom priebehu HIV infekcie dochádza k druhému zvýšeniu obsahu krvi proteínu p24 v krvi. Patrí k obdobiu vzniku AIDS. Zmiznutie voľných (neviazaných protilátkami) jadrových proteínov p24 a objavenie špecifických protilátok na proteíny HIV v krvi naznačujú nástup sérokonverzie (Obrázok 9.6).

Viremia a antigénia spôsobujú tvorbu špecifických protilátok triedy IgM (anti-p24, anti-gp41, anti-gpl120, anti-gp160). triedy bez protilátok IgM a IgG na proteín p24 sa môže zobraziť začína v 2. týždni, ich obsah sa zvyšuje počas 2-4 týždňov, dosiahnutie určitej úrovne, ktorá pretrváva po niekoľko mesiacov (IgM) a S (IgG) (Obr. 9.7).

Vzhľad kompletné sérokonverzie pri periférnej krvi zaznamenané vysoké hladiny špecifických triedy IgG protilátok proti štruktúrnych proteínov HIV p24, gp41, gp120, gp160, čo výrazne uľahčuje diagnózu infekcie HIV. Protilátky proti HIV sa objavujú u 90-95% infikovaných do 3 mesiacov po infekcii, u 5-9% - v období od 3 do 6 mesiacov od času infekcie a neskôr v 0,5-1%.

Napriek tomu, že na poslednom mieste sa objavujú protilátky proti HIV, doposiaľ je hlavným diagnostickým indexom hlavnej laboratórnej diagnostiky detekcia špecifických protilátok ELISA a imunoblotting.

Údaje uvedené v tabuľke 9.2 [View] a 9.3 [View], vizuálne demonštrovať vysokú senzitivitu moderných imunoenzýmových testovacích systémov na detekciu protilátok proti HIV, ktoré prevyšujú citlivosť imunoblotovania. V niektorých prípadoch, keď sa dosiahne primárny pozitívny výsledok v testoch ELISA, môže byť potvrdený imunoblotom až po 2 - 3 týždňoch.

V štúdii u pacientov infikovaných HIV (HIV-pozitívne) s použitím testovacích systémov imunoblotu popredných svetových firiem vo všetkých prípadoch detekované protilátky proti gp160 a p24 / 25 protilátky na iné proteíny prítomné v 38,8-93,3% prípadov (Tabuľka. 9.4 [View] ).

sa môžu vyskytnúť problémy pri detekcii protilátok u pacientov s HIV infekciou v období masívnej virémie a antigenémie ak existujú špecifické protilátky v krvi spojené s vírusovými časticami a replikativní procesu dopredu medzi nových antivírusových protilátok. Takáto situácia môže vzniknúť a zmiznúť počas infekčného procesu [15].

U pacientov s oslabeným imunitným systémom začiatku virémie a antigenémie objavujú skôr a uložené na vysokej úrovni až do výsledku tohto ochorenia. U týchto pacientov majú nízke hladiny voľných protilátok proti HIV z dvoch dôvodov - nedostatočná produkcia protilátok B-lymfocyty a viazanie viriónov a rozpustných proteínov z HIV protilátok, a preto sa pre určenie infekcie požadovanej testovací systém so zvýšenou citlivosťou alebo upraviť metódy analýzy zahŕňa nasledujúce kroky protilátok uvoľnenie z imunitných komplexov [7].

Najčastejšie poklesu protilátok proti HIV, dochádza z dôvodov uvedených v konečnej fáze, kedy sa protilátka HIV v sére nedá zachytiť kroim nie imunologickými metódami alebo metódou immumoblotinga (Western blot). Tiež vzhľad špecifických protilátok proti HIV imunitnej odpovede počas prvých 4 mesiacov, charakterizovaných znížením krvi infikovaných CD4 + - zvýšenie buniek a CD8 +. Ďalej je obsah buniek nesúcich receptory CD4 a CD8 stabilizovaný a zostáva istý čas nezmenený. Zvýšenie obsahu CD8-lymfocytov je ochranná reakcia, pretože bunková závislosť od kptotoxicity sa dosahuje lymfocytmi CD8 +, ktoré sú zamerané na deštrukciu buniek infikovaných HPV. Spočiatku, cytotoxické lymfocyty (CTL), v reakcii na regulačný proteín Nef vírusu, ktorý hrá dôležitú úlohu pri znižovaní vírusovej (RNA) zaťaženie u HIV-infikovaných plazmy v prvých mesiacoch. Potom sa vytvorí odpoveď CTL na ostatné, vrátane. štrukturálne na HIV proteíny, v dôsledku čoho sa po 12 mesiacoch po infekcii cytotoxický účinok významne zvýši.

Schémy laboratórnej diagnostiky infekcie HIV

Vzhľadom na danú dynamiku špecifických markerov infekcie HIV v praxi je vhodné dodržiavať nasledujúce schémy laboratórnej diagnostiky u dospelých (Obrázok 9.8-9.10).

Diagramy odrážajú tri hlavné etapy primárnej laboratórnej diagnostiky infekcie HIV:

  1. Screening.
  2. Referencie.
  3. Expert.

Potreba niekoľkých etáp laboratórnej diagnostiky je primárne spôsobená ekonomickými úvahami. Napríklad náklady na vykonanie jedného odborného vyšetrenia imunoblotovaním pomocou domácich testovacích systémov sú až 40 dolárov, skríning (metódou ELISA) je približne 0,2, to znamená, že pomer je 1: 200.

V prvom štádiu (obrázok 9.8) sú subjekty testované na protilátky proti HIV s použitím jediného enzýmového imunoanalýzového systému určeného na detekciu protilátok na oba typy vírusu - HIV-1 a HIV-2.

V navrhovaných testovacích systémoch používajú výrobné firmy vírusový lyzát, rekombinantné proteíny, syntetické peptidy ako antigénny základ. Každý z týchto nosičov antigénnych determinantov HIV má svoje vlastné zásluhy a nedostatky. Preto pri výbere testovacích systémov s približne rovnakými nákladmi by ste mali uprednostňovať súpravy s najvyššou citlivosťou (najlepšie 100%). Medzi testovacími systémami rovnakých nákladov a citlivosti sa odporúča zamerať sa na tie, ktoré majú maximálnu špecifičnosť.

Na základe lyzátu vírusu boli vytvorené prvé testovacie systémy na laboratórnu diagnostiku HIV infekcie. V 80. rokoch boli takéto testovacie systémy charakterizované citlivosťou nižšou ako 100% a nízkou špecifikou, ktorá sa prejavuje veľkým počtom (až 60%) falošne pozitívnych výsledkov.

Keď sa virión vytvára v lymfocytovej kultúre, jeho membrána je vytvorená z vonkajšej membrány a preto obsahuje antigény hlavného histokompatibilného komplexu triedy I a II. Táto okolnosť spôsobuje falošné pozitívne reakcie, ak sú v krvi pacientov prítomné protilátky proti alo-antigénom histokompatibility.

Neskôr bolo navrhnuté použiť kultúru makrofágov, v ktorej sa vírusové častice tvoria hlavne intracelulárne budením nie z vonkajšej membrány bunky, ale z membrán endoplazmatického retikula. Táto technológia znížila počet falošne pozitívnych výsledkov.

Jeden z najlepších z najdôležitejších vlastností - citlivosť a špecifickosť - testovacie systémy imunitne rozpoznaný, ktoré sa používajú v zložení čisteného vírusového lyzátu kombinácii so syntetickými peptidy, ktoré predstavujú časti antigenznachimye väčšina vírusových proteínov, alebo rekombinantné proteíny.

Citlivosť testovacieho systému závisí aj od charakteristík ostatných komponentov súprav. Testovacie systémy používajúce konjugáty, ktoré rozpoznávajú protilátky nielen IgG triedy, ale tiež IgM a IgA, umožňujú detekciu skoršej fázy sérokonverzie. Aplikácia testovacích systémov, s ktorými je možné súčasne stanoviť ako antivírusové protilátky, tak aj antigén p24, je sľubná, čo robí ešte skoršiu laboratórnu diagnózu HIV infekcie.

Primárny pozitívny výsledok by sa mal opätovne skontrolovať opätovným preskúmaním vzorky v tom istom testovacom systéme, ale prednostne inou sériou a iným laboratórnym asistentom. Ak sa počas druhej štúdie dosiahne negatívny výsledok, štúdia sa uskutoční po tretíkrát.

Po potvrdení pozitívneho výsledku je žiaduce znovu podať krv a vyšetriť ju ako protilátky na HIV ako primárne. Znovuzískanie krvi môže zabrániť chybe v dôsledku nepresnosti označovania tuby a vyplnenia formulárov odporúčania.

Séropozitívna vo fáze skríningu sa krvné sérum posiela na referenčné štúdie vykonané pomocou dvoch alebo troch vysoko špecifických ELISA testovacích systémov. V prípade dvoch pozitívnych výsledkov sa odborná štúdia uskutočňuje imunoblotovou metódou.

Použitie v referenčných diagnostických enzymoimunoanalýzy systémy, ktoré môžu byť použité na diferenciáciu špecifických protilátok proti HIV-1 a HIV-2, umožňuje ďalšiu prácu a umožňuje vyšetrovať pozitívna vzorka v expertnej stupňa bezprostredne za použitia zodpovedajúceho imunoblotu (HIV-1 alebo HIV-2),

Laboratórne znalecké posudky o infekcii HIV sa robia len na základe pozitívneho výsledku imunoblotovania (Western blot). Pri vykonávaní odbornej diagnostiky je potrebné použiť nomenklatúru génov a génových produktov HIV, ktoré navrhla expertná skupina WHO v roku 1990 (tabuľka 9.5 [View] ).

Špecifickosť pruhy na imunoblotu by sa malo hodnotiť veľmi starostlivo a dôkladne, s použitím výsledkov štúdií kontrolným sérom (pozitívne i negatívne), ktoré sú držané v súbežne so štúdiom experimentálnych vzoriek a vzoriek imunoblotu označené HIV proteínu (dodávané výrobcom do testovacieho systému). Interpretácia výsledkov by sa mala vykonať podľa pokynov pripojených k testovaciemu systému. Všeobecne platí, že kritériom pre pozitivity povinné prítomnosť protilátok proti dvom proteínom (prekurzora, vonkajšie alebo transmembránovej) génu kódovaného env, a na možnú prítomnosť protilátok o produkty ďalších dvoch štruktúrnych génov HIV - gag a pol (pozri tabuľku 9.6. [View] ).

V prípade získania pochybného výsledku je potrebné použiť zoznam odporúčaní na konečné objasnenie výsledkov imunoblotovania (tabuľka 9.7 [View] ).

Podľa odporúčaní Ruské vedecké metodického centra pre prevenciu a AIDS, je považovaný za pozitívny výsledok na prítomnosť protilátok proti aspoň jedného z proteínov gp41, gp120, gp160 v kombinácii s protilátkami proti iným HIV-1 špecifických proteínov alebo bez nej [10]. Tieto odporúčania sú založené na skúsenostiach so sérom od detí z nozokomiálnych ložísk, ktoré často určovali protilátky len na jeden z proteínov obalu vírusu.

Prevažná časť primárnej skúmaného séropozitívnych pacientov EIA týka fázy persistiruyushey generalizovaná lymfadenopatia (PGL), alebo asymptomatické fázy. Z tohto dôvodu, v imunoblotu (nitrocelulózové pásu, na ktorom sú imobilizované proteíny HIV), je určená spravidla nasledujúce kombinácie protilátok proti HIV-1: protilátky na obalový proteín gp160, gp120 a gp41, kódovaného génom env, v spojení s protilátkami proti proteínom p24 (proteín nukleokapsidy gén kódovaný gag) a P31 / 34 (endonukleázy kódovaná génom pol).

Pozitívne reakcie len s gagovými a / alebo proteínovými proteínmi sa môžu vyskytnúť v prípade počiatočnej fázy sérokonverzie a tiež naznačujú infekciu spôsobenú HIV-2 alebo nešpecifickú reakciu.

V prípade získania pochybného výsledku je možné použiť rôzne metodické techniky na objasnenie faktu HIV infekcie.

V závislosti od technických možností (dostupnosť diagnostických súprav a reagencií, vybavenie so špeciálnym vybavením a školenie personálu) vykonáva odborné laboratórium ďalšie diagnostické štúdie (obr. 9.10).

V mnohých prípadoch je vhodné použiť molekulárne genetické metódy na určenie genetických sekvencií HIV v sére, v krvných lymfocytoch alebo lymfatických uzlinách. Špecifickosť DNA sekvencií získaných ako výsledok PCR môže byť kontrolovaná hybridizáciou nukleových kyselín so špecifickými DNA sondami.

Metódy rádioimúnoprecipitáciou (RIP) a nepriama imunofluorescencia (IPF), môže byť tiež použitý pre konečné overenie séra s pochybným vedie imunoblotu [14].

Detekcia HIV RNA v plazme kvalitatívnou alebo kvantitatívnou metódou nie je významná pre diagnózu HIV infekcie. Takýto výsledok by sa mal potvrdiť štandardnými metódami, ako je imunoblotovanie, 2-4 mesiace po počiatočnej pochybnej alebo negatívnej odpovedi.

Izolácia HIV v bunkovej kultúre je najvyššou pravdou. Metóda je však komplexná, drahá a je vykonávaná iba v špeciálne vybavených výskumných laboratóriách.

Obsah CD4 + - buniek v krvi je nešpecifický ukazovateľ, ale v prípade sporu (IFA "+" imunoblotu "-", prítomnosť klinických príznakov HIV / AIDS), môže byť použitý ako vodítko pre podávanie odborné rozhodnutia. Ak je v laboratóriu možné vykonávať len imunoblotovanie, postupujte podľa odporúčaní uvedených v tabuľke. 9.7 a na obr. 9.9.

Osoby s odborným štúdie séra boli získané pochybné (neurčité) výsledkov, s výnimkou iba detekciu protilátok proti P17 (HIV-1), alebo p16 (HIV-2), by sa malo uskutočniť opätovné testovanie po dobu 6 mesiacov (po 3 mesiacoch). V prípade skutočnej infekcie HIV po 3 až 6 mesiacoch v spektre protilátok sa pozoruje "pozitívna" dynamika - ďalšia tvorba protilátok proti iným proteínom vírusu. Falošná reakcia je charakterizovaná pretrvávajúcim pochybným obrazom imunologického blotovania alebo zmiznutím podozrivých skupín na dlhú dobu. Ak po tejto dobe spätného imunoblotu zostane negatívne alebo pochybné, potom absencia rizikových faktorov, klinické príznaky, a iných stavov spojených s HIV infekciou, osoba môže byť považovaná za séronegatívne na protilátky proti HIV-1 a HIV-2.

Falošne pozitívne výsledky vzhľadom na obsah v krvi pacientov s protilátkami proti MHC alloantigeny, ktorá je súčasťou obálky HIV, sú uvedené v imunoblotu v prúžky na gp41 a gp31 úrovni. Dôvody iné nešpecifické reakcie (napr, p24, sa často vyskytujú u pacientov s autoimunitnými procesmi), nie sú dosiaľ objasnený.

Zlepšenie technológie výroby imunoenzymatických testovacích systémov umožňuje dosiahnuť vysokú citlivosť - až 99,99%, zatiaľ čo citlivosť metódy imunoblotovania je 97%. Preto negatívny výsledok pri imunoblotovaní s pozitívnymi výsledkami v ELISA môže naznačovať začiatočné obdobie sérokonverzie, charakterizované nízkou úrovňou špecifických protilátok. Preto je potrebné opakovať test po 1,5-2 mesiacoch, to znamená, čas potrebný na dokončenie sérokonverzie, dosiahnutie koncentrácie špecifických protilátok v krvi dostatočných na detekciu imunoblotovou metódou.

Pozitívny výsledok (y) štúdie na odkaz, alebo len skríning fázy laboratórnej diagnostiky infekcie HIV, tj, pozitívny výsledok v každom testovacom systéme ELISA, výsledok nie je potvrdené expertné metódy, je interpretovaný ako prítomnosť v krvi subjektu krížové reakcie protilátok. Krížová reakcia znamená väzbu protilátok na nešpecifické oblasti na HIV proteínoch alebo peptidoch použitých ako antigénna báza v testovacom systéme, v ktorom sa získa pozitívny výsledok.

Pri absencii imunodeficiencie a klinických príznakov infekcie HIV sú takéto osoby považované za seronegatívne na protilátky proti HIV a mali by sa z registra odstrániť.

Konečná diagnóza infekcie HIV je stanovená len na základe všetkých klinických, epidemiologických a laboratórnych údajov. Na informovanie pacienta o diagnostike infekcie HIV má právo len ošetrujúci lekár.

Hlavnou metódou potvrdenia (odbornej) laboratórnej diagnostiky HIV infekcie je imunoblotovanie. Vzhľadom na nižšiu citlivosť v porovnaní s testom ELISA však viacerí vedci navrhli použitie kombinácie viacerých testovacích systémov, aby konečne určili prítomnosť špecifických protilátok proti HIV. Napríklad G. van der Groen et al. [30] navrhla alternatívnu imunoblotovú metódu na testovanie pozitívnych výsledkov skríningového štádia laboratórnej diagnostiky infekcie HIV. Zahŕňa štúdium materiálu paralelne v troch testovacích systémoch, ktoré sú založené na rôznych metódach detekcie špecifických protilátok proti HIV (niekoľko variantov ELISA, aglutinačná reakcia) s použitím antigénov rôznej povahy. Autori sa podarilo vybrať také kombinácie testovacích systémov, ktorých použitie poskytuje 100% citlivosť a špecifickosť v porovnaní s výsledkami získanými pri imunoblotovaní.

Lace metóde expert diagnózy je výhodou, ale nedostatok informácií, na ktoré špecifické proteíny sú vírusové protilátky v krvi pacienta, neumožňuje posúdiť špecifickosť reakcie v každom prípade, a sledovať zmeny v spektre protilátok v raných fázach sérokonverzie.

Laboratórna diagnostika infekcie HIV u detí narodených HIV-infikovanými matkami má svoje vlastné zvláštnosti [24]. Od okamihu narodenia v krvi týchto detí po dlhý čas (až 15 mesiacov) môžu cirkulovať materské protilátky proti HIV. Placentárnu bariéru preniknúť iba imunoglobulíny triedy IgG, tak odhaľuje dieťaťa nmmupoglobulinov HPV-špecifických IgM a IgA triedy umožňuje potvrdenie infekcie, ale negatívny výsledok nemôže poukazujú na neprítomnosť HIV.

U detí mladších ako 1 mesiac nedochádza k replikácii HPV a jedinou metódou overovania je PCR. Stanovenie antigénu p24 u detí starších ako 1 mesiac je tiež potvrdzujúcou metódou.

Nedostatok protilátok proti HIV u novorodencov neznamená, že vírus neprenikol do placentárnej bariéry. Deti matiek infikovaných vírusom HIV sú v každom prípade podrobené laboratórnemu vyšetreniu a pozorovaniu počas 36 mesiacov od narodenia [10].

Výsledky laboratórnych testov na markery infekcie HIV vyžadujú starostlivú interpretáciu a mali by sa zvážiť len v spojení s epidemiologickými a klinickými údajmi. Na druhej strane treba poznamenať, že napriek vysokej citlivosti moderných metód negatívne výsledky výskumu nemôžu úplne vylúčiť prítomnosť HIV infekcie. Preto môže byť negatívny výsledok štúdie, napríklad imunoblotovaním, formulovaný iba ako neprítomnosť špecifických protilátok proti HIV-1 a HIV-2.

Diagnóza infekcie HIV u séronegatívnych pacientov

Kvalita testovacích systémov používaných pri laboratórnej diagnostike infekcie HIV sa každoročne zlepšuje, zvyšuje sa ich citlivosť. Avšak vysoká variabilita HIV môže viesť k objaveniu sa nových typov, protilátky, ktoré nemusia byť rozpoznané existujúcimi testovacími systémami. Okrem toho sú známe prípady atypickej humorálnej reakcie imunitného systému hostiteľského organizmu na vírus. Takže L.Montagnier v roku 1996 označená dvoch pacientov s AIDS, ktorí počas posledných niekoľkých rokov sa nezistili v krvi špecifických protilátok je diagnostika je založená na klinických údajov a potvrdili laboratórne izoláciu iba HPV-1 v kultivovaných bunkách. V takýchto prípadoch je potrebné použiť odporúčania WHO, podľa ktorého je klinická diagnóza infekcie HIV u dospelých a detí, je možné, ak jeden z 12 AIDS definujúcich ochorenia:

  1. Kandidóza pažeráka, priedušnice, priedušiek a pľúc;
  2. extrapulmonárna kryptokokóza;
  3. kryptosporidóza s hnačkou viac ako jeden mesiac;
  4. cytomegalovírusové poškodenie akéhokoľvek orgánu (s výnimkou a okrem pečene, sleziny a lymfatických uzlín u pacienta staršieho ako 1 mesiac):
  5. infekcia spôsobená vírusom herpes simplex, ktorá pretrváva dlhšie ako 1 mesiac u pacientov starších ako 1 mesiac;
  6. lymfómu mozgu u pacienta mladšieho ako 60 rokov;
  7. lymfocytová intersticiálna pneumónia u dieťaťa do 13 rokov;
  8. Disiminovaná infekcia spôsobená baktériami skupiny Micobacterium avium intracellulare alebo M. Kansassii;
  9. pneumónia pneumónia;
  10. progresívna multifokálna leuko-encefalopatia;
  11. toxoplazmózy centrálneho nervového systému u pacientov starších ako 1 mesiac.

Prítomnosť jednej z týchto chorôb umožňuje diagnostikovať infekciu HIV bez možnosti vykonať laboratórny krvný test na prítomnosť protilátok proti HIV, alebo dokonca aj pri sérologickom výsledku.

  1. Federálny zákon Ruskej federácie o prevencii šírenia chorôb spôsobených vírusom ľudskej imunodeficiencie v Ruskej federácii z 30. marca 1995.
  2. Zmushko E.I., Belozerov E. S. HIV infekcia / príručka pre lekárov. - Petrohrad: Peter, 2000. - 320 s.
  3. Isakov VA Aspel YV, Bogoyavlenskii GV et al. Predchádzajúce použitie tsikloferona pri liečbe HIV a AIDS infektsni / ručné vrachey.- SPB, 1997.- 60 pp.
  4. Kozhemyakin LA, Bondarenko IG, typedín AA syndróm získanej imunitnej nedostatočnosti / príručka pre lekárov.- L.: Knowledge, 1990.-112 str.
  5. Lobzin Yu V., Kazantsev AP Sprievodca infekčnými chorobami. - Petrohrad, 1996. - 712 s.
  6. Lysenko A.Ya., Turyanov M.X., Lavdovskaya M.V., Podolsky V.M. HIV infekcia a choroby spojené s AIDS / Monografia. - M.: "Rarog" LLP, 1996, - 624 p.
  7. Novokhatsky LS, Khlyabich GN Teória a prax laboratórnej diagnostiky syndrómu získanej imunitnej nedostatočnosti (AIDS). - M.: VINITI, 1992, - 221 str.
  8. Pokrovsky VI, Pokrovsky VV AIDS: syndróm získanej imunodeficiencie.- M.: Meditsina, 1988.- 43 p.
  9. Pokrovsky VI infekcia HIV alebo AIDS // terapeut, architekt. - 1989. - T. 61, č. 11. - P. 3-6.
  10. Pokrovsky V. V. HIV-infekcia: klinika, diagnostika / pod všeobecným. Ed. VV Pokrovskogo.- Moskva: GEOTAR MEDICINE, 2000.- 496 s.
  11. Rakhmanova A. G. Infekcia HIV (klinika a liečba).- SPb: "SHA", 2000.- 367 str.
  12. Odporúčania na používanie antiretrovírusových liekov u dospelých a adolescentov infikovaných vírusom ľudskej imunodeficiencie // Doplnok Consilium Medicum. Január 2000, - 22 str.
  13. Smolskaya T. T., Leninskaya P. P., Shilova E.A. Serologicheskaya diagnostika infekcie HIV / metodická príručka pre lekárov.- SPb, 1992.- 80 s.
  14. Smolskal TT Druhá dekáda života v podmienkach SPPD: Lessons and Problems / Act Speech. - SPb., 1997.- 56 s.
  15. Khaitov RM, Ignatieva GA AIDS.- M., 1992.- 352 p.
  16. Connor S. Research ukazuje, ako HIV vyčerpáva telo // Brit. Mod. J.- 1995.-zväzok 310.-P 6973-7145.
  17. Burcham J., Marmor M., Dubin N. a kol. CD4 je najlepším prediktorom vývoja AIDS u kohorty HIV-infecteci homosexuálnych mužov. J. AIDS.- 1991.-jN "9.- P.365.
  18. Furlini G., Vignola M., Re MC, Gibellini D., Ramazzotti E., Zauli G.. La Placa M. ľudskej imunodeficiencie typu vírusu interakcie Aj s membránou z CD4 + buniek indukuje syntézu a nukleárnej translokácii proteínu šoku 70K tepelného J.Gen. Virol., 1994, Vol 75, str. 1, str. 193-199.
  19. Gallo R.C. Mechanizmus indukcie ochorenia HIV / / J.AIDS.- 1990.- N3.- P. 380-389.
  20. Gottlieb M. S., Schroff R., Schanker H. a kol. Pneumocystis carinii pneumónia a slizničná kandidóza v predtým homosexuálnom mon / teraz England J. Med. - 1981. - zv. 305. - str. 1425-1430.
  21. Harper M. E., Marsella L. M., R. C. Gallo, Wong-Staal F. Detekcia lymfocytov exprimujúcich ľudský T-lymfotropický vírus typu III v limph uzlín a periférnej krvi z infikovaných jedincov in situ hybridizácia // Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 1986, zv. 83.-N 2.- P. 772-776.
  22. Hess G. Klinické a diagnostické aspekty HIV infection.- Mannheim: Boehringer Mannheim GmbH, 1992.- 37 s.
  23. Hu D.J., Dondero T.J., Ryefild M.A., et al. Vznikajúca genetická diverzita HIV / / JAMA.- 1996. - N 1.- P. 210-216.
  24. Lambin P., Desjobert H., Debbia M. a kol. neopterinu v sére a beta-2-mikroglobulínu v anti-HIV pozitívnej darcov krvi // Lancet.- 1986.- Vol.8517. - str. 1216.
  25. Maldonado I. A., Retru A. Diagnóza detskej choroby HIV // Vedomostná základňa AIDS, Fd. Cohen P.T.; Sande M. A. Voiberding. 1994, str. 8.2.1-8.2.10.
  26. McDougal J. S., Kennedy M.S., Sligh J.M. et al. Väzba HTLV-III / LAV až T4 + T buniek komplexom molekuly 110K a T4 molekuly // Science.- 1985.- Vol.23.- S. 382-385.
  27. Montagnier L., Gougeon M.L., Olivier R. a kol. Faktory a mechanizmy patogenézy AIDS // Vedecké výzvy AIDS. Basel: Karger, 1992. - str. 51-70.
  28. Paterlini P., Lallemant-Le C., Lallemant M. a kol. Polimerázová reťazová reakcia na štúdium matky na prenos HIV-1 do dcér v Afrike // J. Med. Virola. - 1990.- zv. 30, N 10.- P. 53-57.
  29. Polis M. A., Masur H. Predvídanie progresie na AIDS // Amor. J. Med. - 1990.- zv. 89, N 6.- str. 701-705.
  30. Roddy M. M., Grieco M. H. Zvýšené hladiny rozpustných IL-2 receptorov v sére HIV-infikovaných populácií AIDS Res. Hum. Retrovir. - 1988. - Zväzok 4, č. 2. - str. 115-120.
  31. Van dor Groen. G., Van Kerckhoven I. a kol. Zjednodušené a lacnejšie v porovnaní s tradičným spôsobom potvrdenia infekcie HIV // Bull. WHO.- 1991.- T. 69, č. 6.- 81-86.

zdroj: Zdravotnícke laboratórne diagnostiky, programy a algoritmy. Ed. prof. Karpischenko AI, Petrohrad, Intermedika, 2001

Sérové ​​markery pre ružienku, infekciu HIV, CMV infekciu, toxoplazmózu, infekčnú mononukleózu

Nešpecifické sérové ​​markery. Nešpecifickými sérových markerov vírusových a bakteriálnych infekcií zahŕňajú akútny zápal proteíny fázy (pozri "proteínov akútnej fázy zápalu."), C-reaktívny proteín, amyloidový proteín A, oruzomukoid, alfa-1-antitrypsín, haptoglobín, fibrinogén, zložky komplementu C3 a C4. Úroveň týchto bielkovín sa zvyšuje po 24-48 hodinách po nástupe infekčného procesu a koreluje s aktivitou ochorenia, etapou procesu. V súvislosti s nešpecifickosťou proteínov akútnej fázy zápalu je ich diagnostická významnosť obmedzená a ich použitie sa často používa na sledovanie priebehu ochorenia a kontrolu účinnosti liečby.

Špecifické sérové ​​markery infekčných ochorení sú špecifické protilátky detegované sérologickými testami.

Indikácie pre špecifické sérologické testy sú: diagnostiku akútnych a chronických infekčných ochorení, diagnostika vrodených infekcií, posúdenie špecifickej imunity u tehotných žien k riešeniu problému prevencia vnútromaternicové infekcie, diagnostiky sekundárnych infekcií a HIV. Pacienti s rizikom prítomnosti ochorení indikátorov AIDS sa podrobia vyšetreniu.

Pre sérologické metódy diagnostiky sú: RAC, RA, Phragmites, HI, rádioimunoanalyticky, enzýmového imunologického testu, imunofluorescencie, metódy chemiluminiscenciu, imunoblotování. Súčasný komerčné testovací systém môže stanoviť špecifické protilátky sa skúšaným patogénov triedy IgM, IgG, IgA.

Detekcia protilátok typu IgM indikuje primárnu infekciu (infekciu) alebo exacerbáciu chronického infekčného procesu. Pri detekcii protilátok ako IgG alebo celkových protilátok (IgM + IgG) je potrebný párový test séra pacienta na objasnenie diagnózy. Analýza sa uskutočňuje na začiatku ochorenia a 2-4 týždne po objavení sa klinických príznakov. 4-násobné (alebo viac) zvýšenie titrov protilátok v akútnych a rekonvalescentných štádiách ochorenia tiež naznačuje akútnu infekciu. Ak sa titer protilátok v opakovaných štúdiách nezmení, považuje sa to za indikátor prenosnej infekcie. Vo väčšine prípadov po prenesených infekčných ochoreniach pretrvávajú protilátky triedy G v nízkych titroch po celý život a sú sérovými markérmi prenesenej choroby.

Infekcia HIV. HIV protilátky sa zvyčajne objavujú v priebehu 1-3 mesiacov po infekcii, aspoň 6 mesiacov neskôr. Keď sa získa pozitívny výsledok, sú protilátky proti HIV stanovené dvakrát. V prípade, že pozitívny výsledok opakovaných štúdie potvrdili, aspoň raz, štúdia sa vykonáva imunoblotu, ktorý detekuje prítomnosť protilátok k vonkajšiemu obalu vírusové častice (gp41, gp120, gp160). Prítomnosť protilátok na jeden z týchto proteínov môže diagnostikovať infekciu HIV.

Infekčná mononukleóza. Reakcia nepriamy aglutinačný (reakcia Henge) určuje protilátok (IgM, IgG, IgA) do kapsidy, nekapsidnym, jadrové a skorých antigénov. Diagnostické titre špecifických protilátok sa zisťujú v 2-3 týždňoch choroby.

Titre IgM, IgG na kapsidové antigény dosahujú vrchol po 3-4 týždňoch. Úroveň IgM sa rýchlo znižuje a po 3 mesiacoch tieto protilátky nie sú detegované. Tituly IgG tiež klesajú, ale môžu cirkulovať v krvi počas celého života. Perzistencia IgG vo vysokých titroch naznačuje dlhý priebeh infekcie, prítomnosť CRF, leukémia, infekciu HIV, reumatoidnú artritídu, stavy imunitnej nedostatočnosti.

Protilátky proti skorým antigénom cirkulujú v krvi počas 2 až 3 mesiacov av 20% prípadov sú zistené v chronickom priebehu ochorenia. Vysoké titre týchto protilátok sa pozorujú aj pri: tehotenstve, stavoch imunodeficiencie, infekcii HIV atď.

Protilátky proti jadrovým antigénom sa objavujú po 2 mesiacoch a nepretrvávajú v nízkych titroch. Detekcia protilátok proti jadrovým antigénom naznačuje súčasnú infekciu.

Toxoplazmóza. Protilátky IgM neprechádzajú cez placentu a ich prítomnosť u novorodencov naznačuje infekciu (nesmie sa zamieňať s prítomnosťou toxoplazmózy!). 4-násobné zvýšenie titrov protilátok naznačuje akútnu toxoplazmózu.

Rubeola. Potvrdzuje prítomnosť detekcie protilátok proti moču získanej z rubeoly a zvýšenie ich titrov v DSC a neutralizačnej reakcii 4 alebo viackrát. Protilátky proti zčervenaniu sa môžu detegovať pri latexovej aglutinácii a ELISA reakciách.

Prítomnosť vrodenej rubeoly je indikovaná anti-blastovými protilátkami triedy IgM, ako aj stabilne vysokými titrami IgG počas niekoľkých mesiacov.

Odovzdať dátum: 2015-04-10; počet zobrazení: 1575; OBJEDNAŤ ZÁZNAM PRÁCE